Новости
Ученые требуют переподчинить ФАНО РАН
Новости Вставить в блог Код: Превью:  Понедельник, 25 июля 2016 Г. Коллективное открытое письмо на имя

Serpregion.ru - Заблокированы крупнейшие новостные порталы Серпуховского региона
Вечером 1 августа Роскомнадзор заблокировал доступ к интернет-порталу газеты «Ока-инфо». Причина внесения сайта издания в т.н. «реестр запрещённых» довольно спорная. Нынешней весной в правоохранительные

Пермские врачи возмущены новостью Минздрава о чудесном спасении пациентки
09 августа 2016 18:04 Общество, Здоровье Стали известны подробности спасения 23-летней девушки, которая пробыла в состоянии клинической смерти около 9 минут. Как выяснилось, пациентку вернула к

Современная медицина позволяет людям со статусом «ВИЧ положителен» вести обычную жизнь
Мировая медицина достигла больших успехов в лечении ВИЧ-инфекции. Теперь, получая необходимую терапию, люди с таким диагнозом живут полноценной жизнью, что особенно важно для детей и подростков. Подростки,

На общем собрании РАН предложили переподчинить ФАНО президиуму Академии
МОСКВА, 23 марта. /ТАСС/. Вице-президент Российской академии наук и председатель Сибирского отделения РАН академик Александр Асеев предложил переподчинить Федеральное агентство научных организаций (ФАНО)

Иссякание благолепия
Профсоюз РАН звонит во все колокола, прося о сохранении ведомственных медицинских учреждений. Недавняя беседа президента РАН академика Фортова с Владимиром Владимировичем обнадёжила: Путин заметил, что

Наш гость -- Лев Щукин, Протвино
Узнавай настороженности миллионным на www. novostiazyfikoz.intergun.ru  ••• Комментировать0. Обрати Серпухов. Главные колки региона. Инволюции Серпухова: Снаряжения.   В Протвино взошли велосипедиста.

Витилиго 2017:новое в лечении. Новости медицины, лекарства здесь!
Витилиго 2017: восстановить пигментацию кожи помогает тофацитиниб, а также сочетание метилпреднизолона и ультрафиолета 311 нм. Кроме того, есть результат 10-летнего исследования: обнаружены гены витилиго.

Витилиго: причины и лечение
Витилиго — это довольно распространённое заболевание кожи. Всего насчитывается около четырех процентов жителей планеты, которые им страдают. Витилиго проявляется в виде хаотично разбросанных по всему

Пермская медицина входит в десятку худших в стране
К таким выводам пришли активисты Народного фронта, совершая поездки по муниципалитетам Пермского края, посещая медицинские учреждения, проводя мониторинг удовлетворенности населения медицинской помощью,

Реклама

Противовирусное действие экстракта ежевики против вируса простого герпеса типа 1

  1. Роберт Дж. Данахер
  2. Чунмэй Ван
  3. Джин Дай
  4. Рассел Дж. Мампер
  5. Крейг С. Миллер
  6. Аннотация
  7. методы
  8. Результаты
  9. Выводы
  10. методы
  11. Подготовка экстракта ежевики
  12. Результаты
  13. Более высокие концентрации требуются для противовирусного действия, когда экстракт ежевики добавляется...
  14. Инкубация с экстрактом ежевики в течение 1 часа при 37ºC инактивирует ВПГ-1
  15. Кратковременная инкубация с экстрактом ежевики при комнатной температуре инактивирует ВПГ-1
  16. обсуждение
  17. Подтверждения
  18. Сноски
  19. Рекомендации

Oral Surg Oral Med Оральный патол Оральный радиол Эндод. Авторская рукопись; доступно в PMC 2012 1 сентября.

Опубликовано в окончательной редакции в виде:

PMCID: PMC3154751

NIHMSID: NIHMS312990

, PhD, 1, MS, 1, PhD, 2, PhD, 2,3 и, DMD., MS.1, *

Роберт Дж. Данахер

1Отдел практики гигиены полости рта, Центр исследований здоровья полости рта, Стоматологический колледж, Университет Кентукки, Лексингтон, Кентукки

Чунмэй Ван

1Отдел практики гигиены полости рта, Центр исследований здоровья полости рта, Стоматологический колледж, Университет Кентукки, Лексингтон, Кентукки

Джин Дай

2Four Tigers LLC, 1501 Bull Lea Road, Suite 105, Лексингтон, Кентукки 40511

Рассел Дж. Мампер

2Four Tigers LLC, 1501 Bull Lea Road, Suite 105, Лексингтон, Кентукки 40511

3Division of Molecular Pharmaceuticalics, UNC Eshelman School of Pharmacy, Университет Северной Каролины в Чапел-Хилл, Чапел-Хилл, Северная Каролина, 27599-7355

Крейг С. Миллер

1Отдел практики гигиены полости рта, Центр исследований здоровья полости рта, Стоматологический колледж, Университет Кентукки, Лексингтон, Кентукки

1Отдел практики гигиены полости рта, Центр исследований здоровья полости рта, Стоматологический колледж, Университет Кентукки, Лексингтон, Кентукки

2Four Tigers LLC, 1501 Bull Lea Road, Suite 105, Лексингтон, Кентукки 40511

3Division of Molecular Pharmaceuticalics, UNC Eshelman School of Pharmacy, Университет Северной Каролины в Чапел-Хилл, Чапел-Хилл, Северная Каролина, 27599-7355

* Почтовый адрес соответствующего автора: д-р Крейг С. Миллер, 800 Rose Street, MN324 Oral Medicine, Стоматологический колледж, Медицинский центр Университета Кентукки, Лексингтон, KY 40536-0297. Телефон: (859) -323-5950. Номер факса: (859) -323-9136. [email protected] Смотрите другие статьи в PMC, которые цитировать опубликованная статья.

Аннотация

Задача

Оценить противовирусные свойства экстракта ежевики против вируса простого герпеса типа 1 (ВПГ-1) in vitro.

методы

Инфицированные HSV клетки орального эпителия (OKF6) и бесклеточные вирусные суспензии обрабатывали экстрактом ежевики (от 2,24 до 1400 мкг / мл), а выход вируса и инфекционность определяли количественно прямым анализом бляшек.

Результаты

Экстракт ежевики ≥ 56 мкг / мл ингибировал репликацию ВПГ-1 в эпителиальных клетках полости рта на> 99% (р <0,005). Концентрации ≥ 280 мкг / мл были противовирусными, когда экстракт добавляли после адсорбции и проникновения вируса. Воздействие на бесклеточный вирус ≥ 280 мкг / мл экстракта ежевики в течение 15 минут при комнатной температуре было вирулицидным (р = 0,0002). Вируцидные эффекты не были связаны с изменениями рН при концентрациях до 1500 мкг / мл.

Выводы

Экстракт ежевики ингибировал ранние стадии репликации HSV-1 и обладал мощной вирулицидной активностью. Эти свойства позволяют предположить, что этот натуральный фруктовый экстракт может обеспечить преимущество в качестве местного профилактического / терапевтического средства при ВПГ-инфекциях.

Ключевые слова: вирус простого герпеса, противовирусный препарат, экстракт ежевики

Вирус простого герпеса (ВПГ) - это эпителиотропный вирус, который поражает детей и большинство взрослых. 1 , 2 Инфекция эпителиальных клеток (то есть слизистой оболочки и кожи) приводит к разложению, быстрой репликации и распространению на соседние клетки и окончания нервных клеток. Поглощение вирионов нервными окончаниями позволяет вирусу ретроаксонически перемещаться к телам нервных клеток внутри тройничного ганглия, после чего устанавливается состояние покоя. 3 , 4 ДНК HSV постоянно находится в ядрах нейронов в состоянии, которое позволяет периодическую реактивацию и рецидив вируса потомства. 5 , 6 Способность вируса прятаться в относительно иммунных сайтах затрудняет ликвидацию этого вируса.

Терапевтические варианты против ВПГ-инфекции включают использование местных или системных противовирусных средств. 7 - 11 Актуальные агенты обладают потенциальными преимуществами прямого контакта и нарушения различных аспектов жизненного цикла вируса, однако большинство коммерчески доступных топических агентов не проникают эффективно и, таким образом, было показано, что они имеют лишь незначительное преимущество в ограничении извержения и продолжительности поражения. 11 - 14 Кроме того, местные противовирусные препараты могут быть дорогими в использовании, особенно потому, что они часто требуют частых и периодических применений. В качестве альтернативы природные противовирусные биохимические вещества, содержащиеся в растениях и фруктах, могут быть менее дорогостоящими и более эффективными в использовании. До настоящего времени было доказано, что экстракты семян, растений, корней и плодов обладают противовирусной активностью. 15 - 21 Следует отметить, что большое количество маленьких молекул, таких как фенольные, полифенольные и флавоноидные, обнаруженные в плодах, как сообщается, являются активными противогерпетическими агентами. 16

Ранее наша лаборатория показала, что ежевика, которая богата фенольными, полифенолами и флавоноидами, обладает антиоксидантными, противовоспалительными и антипролиферативными свойствами. 22 , 23 Однако, насколько нам известно, научных исследований противовирусных свойств экстракта ежевики не поступало. Поскольку инфекции ВПГ остаются глобальной проблемой здравоохранения, мы стремились исследовать противовирусное действие экстракта против этого хорошо известного вирусного патогена.

методы

Анализ клеточной культуры и вирусной инфекционности

Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов OKF6 / hTERT-2 (OKF6), установленная эктопической экспрессией каталитической субъединицы теломеразы (hTERT) в клетках нормального эпителия слизистой оболочки полости рта, была получена от доктора Джеймса Райнвальда, Гарвардская медицинская школа. 24 Клетки Vero были получены из Американской коллекции типовых культур (Rockville, Md). Клетки высевали в 6-луночные чашки для тканевых культур при 3,75 и 6,25 × 105 клеток / лунку соответственно в среде Ker-SFM и инкубировали при 37 ° C в увлажненном инкубаторе с 5% CO2. На следующий день клетки инокулировали штаммом HSV-1 17+, полученным от N. Fraser из Института Вистар, Филадельфия, при множественности инфекции (MOI) ≤ 0,05 и инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа. После двух промывок фосфатно-солевым буфером (PBS) добавляли свежую среду и инкубирование при 37 ° C продолжали в течение ночи. Через двадцать четыре часа после инокуляции вирус высвобождали тремя циклами замораживания-оттаивания, и выход вируса определяли в двух экземплярах путем прямого анализа бляшек на монослоях клеток Vero, как мы ранее описывали. 25 В анализах, ингибирующих репликацию вируса, в трехкратные культуры добавляли экстракт ежевики в моменты времени (во время адсорбции, после удаления инокулятов вируса или в течение всего времени) и указанные концентрации. В анализах на вирулицидность бесклеточные вирусные суспензии (от 25000 до 50000 единиц, образующих бляшки [PFU] / мл) инкубировали с экстрактом ежевики при 37 ° С в течение 1 часа или при комнатной температуре в течение 15 минут. Вируцидные анализы прекращали в указанное время разбавлением реакционной смеси до не противовирусных уровней экстракта ежевики (1: 100 питательных сред). Инфекцию вируса определяли прямым анализом бляшек и представляли как количество оставшихся PFU относительно контрольных обработанных вирусных суспензий.

Подготовка экстракта ежевики

Ежевика шелухи ( Rubus e ubatus cv. «Hull») выращивалась на фермах WindStone (Париж, Кентукки). Семена и кожуру удаляли с использованием колоссального пульпера Langsenkamp типа 161 и полученное в результате пюре хранили при -20ºC. Этанольные экстракты были получены из пюре. 22 Вкратце, пюре из ежевики (10 г) обрабатывали ультразвуком в течение 30 мин с 25 мл экстракционного растворителя этанола, содержащего 0,01% HCl (об. / Об.). Супернатанты собирали после фильтрации и сушили роторным испарением при 40ºC. Высушенный экстракт ресуспендировали в деионизированной воде и фильтровали через фильтровальную бумагу 20-25 мкм и лиофилизировали для получения высушенных этанольных экстрактов. Высушенные экстракты затем повторно растворяли в деионизированной воде в виде исходного раствора (140 мг / мл, рН 1,9-2,0) и хранили при -80ºC до использования.

Результаты

Экстракт ежевики обладает анти-ВПГ-1 свойствами

Чтобы определить, обладает ли экстракт ежевики противовирусными свойствами, была оценена его способность ингибировать цикл репликации HSV-1 в эпителиальных клетках полости рта. Для широкой оценки возможных противовирусных активностей культуры поддерживали в присутствии возрастающих концентраций экстракта ежевики (0, 2,24, 11,2, 56, 280 и 1400 мкг / мл) на протяжении всего цикла репликации (т.е. адсорбции, проникновения и продукции потомства). Как показано на рисунке, экстракт ежевики в концентрации 56 мкг / мл значительно снижал выход ВПГ-1 более чем на 99% (р = 0,004), а вирус потомства не обнаруживался в культурах, обработанных экстрактом в концентрациях ≥ 280 мкг / мл.

Экстракт ежевики обладает противовирусными свойствамиЭкстракт ежевики обладает противовирусными свойствами

Эпителиальные клетки полости рта инокулировали штаммом HSV-1 17+ (MOI = 0,05) в присутствии указанной концентрации экстракта ежевики. После адсорбции клеток при 37 ° С и двух промывок PBS добавляли свежую среду для культивирования клеток, содержащую указанную концентрацию экстракта ежевики, и инкубацию продолжали в течение ночи при 37 ° С. Через двадцать четыре часа после инокуляции клетки оттаивали 3 раза замораживанием и количественно определяли выход вируса на монослоях клеток Vero прямым анализом бляшек. Данные представляют среднее +/- SD анализов на тройную репликацию (т.е. n = 3). *, р <0,005.

Более высокие концентрации требуются для противовирусного действия, когда экстракт ежевики добавляется после введения ВПГ-1.

Клетки OKF6 инокулировали вирусом (MOI 0,05), инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа и промывали 2 раза PBS перед добавлением среды, дополненной указанной концентрацией экстракта ежевики. Выход вируса оценивали через 24 часа после инокуляции титрованием на клетках Vero после 3 циклов замораживания-оттаивания. Хотя 56 мкг / мл экстракта ежевики значительно снижают выход вируса, когда он присутствует на протяжении всего цикла репликации (), значительное снижение выхода вируса, когда оно обеспечивается после 1-часовой адсорбции и стадии входа, требует концентрации> 280 мкг / мл (). Аналогичные результаты были получены в экспериментах, где клетки Vero были инфицированы HSV-1, а затем подвергались воздействию экстракта ежевики (данные не показаны).

Вход в клетку защищает ВПГ-1 от противовирусного воздействия экстракта ежевикиВход в клетку защищает ВПГ-1 от противовирусного воздействия экстракта ежевики

Штамм HSV-1 17+ добавляли к клеткам эпителия полости рта при MOI = 0,05 и давали возможность адсорбироваться и вводиться в течение 1 часа при 37 ° C. Добавляли свежую среду для культивирования клеток, содержащую указанную концентрацию экстракта ежевики, и инкубацию продолжали в течение ночи, после чего проводили два промывания PBS. Через двадцать четыре часа после инокуляции клетки оттаивали 3 раза замораживанием и количественно определяли выход вируса на монослоях клеток Vero прямым анализом бляшек. Данные представляют среднее +/- SD анализов на тройную репликацию (т.е. n = 3). *, р <0,005.

Инкубация с экстрактом ежевики в течение 1 часа при 37ºC инактивирует ВПГ-1

Тот факт, что экстракт ежевики в концентрациях ≥ 56 мкг / мл) значительно снижает выход вируса (> 99%), когда присутствует в течение периода инокуляции и репликации, но не влияет на выход при концентрациях ≤ 280 нг / мл при добавлении после проникновения вируса () указано, что экстракт ежевики может либо инактивировать вирус напрямую, либо блокировать проникновение вируса. Чтобы определить, что экстракт ежевики инактивирует HSV-1, экстракт добавляли к бесклеточным вирусным суспензиям в указанных концентрациях и инкубировали при 37 ° С в течение 1 часа для имитации фазы адсорбции и входа. Суспензии вируса, обработанные экстрактом ежевики, разводили культуральной средой выше антивирусной концентрации (1: 100), а затем определяли инфекционность вируса прямым анализом бляшек. В этих экспериментах даже при самых высоких использованных концентрациях экстракт не влиял на количество жизнеспособных эпителиальных клеток (данные не показаны). Как указано в, количество инфекционного вируса HSV-1, остающегося после 1-часовой инкубации при 37 ° С с 280 мкг / мл экстракта ежевики, было значительно снижено по сравнению с контрольными культурами. Взятые вместе, эти данные указывают на дозозависимый противовирусный эффект экстракта ежевики и что этот эффект был наиболее выражен на уровне инактивации бесклеточного вируса.

BBE инактивирует HSV-1BBE инактивирует HSV-1

Бесклеточные суспензии HSV-1 (штамм 17+) инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа с указанной концентрацией BBE. Вирус инфекций определяли количественно прямым анализом бляшек в трех экземплярах. Результаты представляют собой среднее значение двух независимых экспериментов (n = 2) и представлены относительно необработанных контролей (100%). *, р <0,005.

Кратковременная инкубация с экстрактом ежевики при комнатной температуре инактивирует ВПГ-1

Для дальнейшей оценки эффективности экстракта ежевики на инфекционность вируса суспензии ВПГ-1 инкубировали с указанной концентрацией экстракта при комнатной температуре в течение 15 минут для имитации внутриротового применения. Инфекцию HSV-1 определяли прямым анализом бляшек на монослоях клеток Vero. Как и выше, воздействие на бесклеточный вирус ≥ 280 мкг / мл экстракта ежевики всего за 15 минут значительно снижало инфекционность ВПГ-1 (). Здесь требуются более высокие концентрации экстракта ежевики с ≥ 560 мкг / мл экстракта ежевики, устраняющего по меньшей мере 50% инфекционного вируса, и концентрации ≥ 1500 мкг / мл экстракта ежевики, снижающего> 90% инфекционного вируса. Поскольку известно, что кислотный рН влияет на инфекционность ВПГ-1, мы количественно определяли рН всех протестированных концентраций. Здесь разбавленный экстракт оставался в пределах нейтрального pH (то есть,> 6,8), предполагая, что противовирусный эффект был более вероятно связан с природными компонентами в экстракте ежевики, чем pH.

BBE инактивирует HSV-1BBE инактивирует HSV-1

Бесклеточные суспензии HSV-1 (штамм 17+) инкубировали при комнатной температуре в течение 15 минут с указанной концентрацией BBE. Инфекционный вирус количественно определяли прямым анализом бляшек в трех экземплярах. Результаты представляют собой среднее значение двух независимых экспериментов в двух экземплярах (n = 4) и представлены относительно необработанных контролей (100%). *, р <0,005.

обсуждение

Ежевика является естественным и обильным фруктом, который растет в дикой природе и в качестве культурных сортов. Уже в 16 веке сок ежевики использовали для лечения инфекций рта и глаз. Экстракт, сок и листья ежевики богаты полифенолами, которые обладают противовоспалительными и антибактериальными свойствами. 23 , 26 Здесь мы продолжили исследования экстракта ежевики, изучив его противовирусные свойства и механизм действия. Эти исследования дополняют растущее количество доказательств того, что экстракт ежевики может принести пользу большому проценту населения мира, нацелившись на хорошо признанный вирусный патоген.

В исследованиях ингибирования вируса, проведенных с экстрактом ежевики, мы обнаружили, что было почти полное ингибирование роста HSV-1 in vitro при концентрациях> 56 мкг / мл. Противовирусные эффекты были наиболее заметны, когда свободный вирус подвергался непосредственному воздействию экстракта ежевики ( т.е. до заражения), и были менее эффективными после того, как HSV-1 адсорбировался и проникал в эпителиальные клетки ( то есть либо в клетки OKF6, либо в клетки Vero). Это указывает на то, что экстракт обладает сильными противовирусными эффектами, которые препятствуют адсорбции или проникновению в клетки-хозяева и некоторой внутриклеточной активности. Хотя были определены минимальные ингибирующие концентрации, остается определить, является ли основной ингибирующий эффект следствием нарушения вирусных белков, участвующих в связывании рецепторов клетки-хозяина, адсорбции и / или проникновении вирионов.

Было показано, что полифенолы, полученные из растений, обладают противовирусной активностью (обзор в 16 , 27 ). В частности, обнаружено, что флавоноиды галангин, кверцетин, процианидин и пеларгонидин, а также процианидин С-1 являются вирулицидными в отношении ВПГ. 21 , 28 - 30 Противовирусный эффект этих веществ наибольший при использовании перед адсорбцией вируса 30 - 32 что согласуется с нашими выводами. Известно, что ежевика содержит большое количество антоцианов и эллагитанинов, поэтому эти полифенолы в экстракте ежевики, вероятно, вносят индивидуальный или синергический вклад в наблюдаемые противовирусные эффекты.

Таким образом, наши результаты показывают, что экстракт ежевики с его ингибирующей репликацией вируса и быстрой вирулицидной активностью может быть эффективным средством для местного лечения и / или профилактики герпетических инфекций полости рта. Эти результаты закладывают основу для будущих исследований, которые позволят выделить и идентифицировать биоактивные молекулы анти-ВПГ в экстракте ежевики и определить, проявляют ли биологически активные принципы в экстракте ежевики противовирусные эффекты против дополнительных штаммов и серотипов ВПГ (т.е. ВПГ-2). ) в доклинических и токсических оценках.

Подтверждения

Описанный проект был поддержан наградой R41DE018839 от Национального института стоматологических и черепно-лицевых исследований CSM, RJD, JD и RJM. Содержание является исключительной ответственностью авторов и не обязательно отражает официальную точку зрения Национального института стоматологических и черепно-лицевых исследований или Национального института здоровья.

Сноски

Отказ от ответственности издателя. Это PDF-файл неотредактированной рукописи, которая была принята для публикации. В качестве услуги для наших клиентов мы предоставляем эту раннюю версию рукописи. Рукопись будет подвергаться редактированию, верстке и рецензированию полученного доказательства до его публикации в окончательной цитируемой форме. Обратите внимание, что во время производственного процесса могут быть обнаружены ошибки, которые могут повлиять на содержимое, и все правовые оговорки, относящиеся к журналу, относятся к этому.

Рекомендации

1. Bader C, Crumpacker CS, Schnipper LE, Ransil B, Clark JE, Arndt K, et al. Естественная история рецидивирующего лицево-орального заражения вирусом простого герпеса. J Infect Dis. 1978; 138 (6): 897–905. [ PubMed ] [ Google ученый ] 2. Смит Дж. С., Робинсон Н. Дж. Возрастная распространенность инфекции вирусом простого герпеса типов 2 и 1: глобальный обзор. J Infect Dis. 2002; 186 (Приложение 1): S3–28. [ PubMed ] [ Google ученый ] 3. Стивенс Дж., Кук М.Л. Латентный вирус простого герпеса в спинальных ганглиях мышей. Наука. 1971; 173: 843–45. [ PubMed ] [ Google ученый ] 4. Стивенс Дж. Латентный вирус простого герпеса и нервной системы. Curr Top Микробиол Иммунол. 1975; 70: 31–50. [ PubMed ] [ Google ученый ] 5. Кауфман Х.Е., Браун Д.К., Эллисон Э.М. Рецидивирующий герпес у кролика и человека. Наука. 1967; 156 (3782): 1628–9. [ PubMed ] [ Google ученый ] 6. Лахманн Р. Латентность вируса простого герпеса. Эксперт Рев Мол Мед. 2003; 5 (29): 1-14. [ PubMed ] [ Google ученый ] 7. Spruance SL, Crumpacker CS, Schnipper LE, Kern ER, Marlowe S., Arndt KA, et al. Раннее, по инициативе пациента лечение герпеса полового члена актуальным 10% ацикловиром. Противомикробные агенты Chemother. 1984; 25 (5): 553–5. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 8. Спруэнс С.Л., Нетт Р., Марбери Т., Вольф Р., Джонсон Дж., Сполдинг Т. Крем с ацикловиром для лечения простого герпеса: результаты двух рандомизированных двойных слепых многоцентровых клинических испытаний с контролем на носителе. Противомикробные агенты Chemother. 2002; 46 (7): 2238–43. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 9. Spruance SL, Rea TL, Thoming C, Tucker R, Saltzman R, Boon R. Penciclovir крем для лечения простого герпеса. Рандомизированное многоцентровое двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Актуальная совместная исследовательская группа по пенцикловиру. JAMA. 1997; 277 (17): 1374–9. [ PubMed ] [ Google ученый ] 10. Скалли С. Орофациальные вирусные инфекции простого герпеса: современные представления об эпидемиологии, патогенезе и лечении, а также нарушениях, в которые может быть вовлечен вирус. Oral Surg Oral Med Оральный патол. 1989; 68 (6): 701–10. [ PubMed ] [ Google ученый ] 11. Ву С.Б., Чаллакомб С.Дж. Управление рецидивирующими оральными инфекциями простого герпеса. Oral Surg Oral Med Оральный патол Оральный радиол Эндод. 2007; 103 (Дополнение): S12, e1–18. [ PubMed ] [ Google ученый ] 12. Freeman DJ, Sheth NV, Spruance SL. Неспособность актуального ацикловира в мази проникать в кожу человека. Противомикробные агенты Chemother. 1986; 29 (5): 730–2. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 13. Раборн Г.В., МакГоу В.Т., Грейс М., Перси Дж. Лечение губного герпеса ацикловиром. Обзор трех клинических испытаний. Am J Med. 1988; 85 (2А): 39–42. [ PubMed ] [ Google ученый ] 14. Raborn GW, McGaw WT, Grace M, Houle L. Herpes labialis лечение 5-процентной мазью с ацикловиром. J Can Dent Assoc. 1989; 55 (2): 135–7. [ PubMed ] [ Google ученый ] 15. Kanekiyo K, Hayashi K, Lee JB, Takenaka H, ​​Hayashi T. Структура и противовирусная активность кислого полисахарида из съедобной сине-зеленой водоросли, Nostoc flagelliforme. Якугаку Засси. 2008; 128 (5): 725–31. [ PubMed ] [ Google ученый ] 16. Хан М.Т., Атер А., Томпсон К.Д., Гамбари Р. Экстракты и молекулы лекарственных растений против вирусов простого герпеса. Antiviral Res. 2005; 67 (2): 107–19. [ PubMed ] [ Google ученый ] 17. Эланчежиян М., Раджараджан С., Раджендран П., Субраманян С., Тьягараджан С.П. Противовирусные свойства экстракта семян индийского лекарственного растения Pongamia pinnata, Linn. против вирусов простого герпеса: исследования in vitro на клетках Vero. J Med Microbiol. 1993; 38 (4): 262–4. [ PubMed ] [ Google ученый ] 18. Котт В., Барбини Л., Круанес М., Муньос Д.Д., Вивот Е., Круанес Дж. И др. Противовирусная активность у аргентинских лекарственных растений. J Этнофармакол. 1999; 64 (1): 79–84. [ PubMed ] [ Google ученый ] 19. Педраса-Чаверри Дж., Карденас-Родригес Н., Орозко-Ибарра М., Перес-Рохас Ю.М. Лечебные свойства мангостина (Garcinia mangostana) Food Chem Toxicol. 2008; 46 (10): 3227–39. [ PubMed ] [ Google ученый ] 20. Лопес А., Хадсон Дж. Б., Тауэрс Г.Х. Противовирусная и антимикробная активность колумбийских лекарственных растений. J Этнофармакол. 2001; 77 (2–3): 189–96. [ PubMed ] [ Google ученый ] 21. Мейер Дж., Афолаян А.Ю., Тейлор М.Б., Эразмус Д. Противовирусная активность галангина, выделенного из надземных частей Helichrysum aureonitens. J Этнофармакол. 1997; 56 (2): 165–9. [ PubMed ] [ Google ученый ] 22. Dai J, Patel JD, Mumper RJ. Характеристика экстракта ежевики и его антипролиферативных и противовоспалительных свойств. J Med Food. 2007; 10 (2): 258–65. [ PubMed ] [ Google ученый ] 23. Дай Дж., Мампер Р.Дж. Растительные фенолы: экстракция, анализ и их антиоксидантные и противоопухолевые свойства. Молекулы. 2010; 15 (10): 7313–52. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 24. Диксон М.А., Хан В.К., Ино Й., Ронфард В., Ву Дж.Й., Вайнберг Р.А. и др. Кератиноциты человека, которые экспрессируют hTERT, а также обходят механизм, стимулируемый p16 (INK4a), который ограничивает продолжительность жизни, становятся бессмертными, но сохраняют нормальные характеристики роста и дифференцировки. Mol Cell Biol. 2000; 20 (4): 1436–47. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 25. Миллер К.С., Смит К.О. Улучшенная репликация вируса простого герпеса типа 1 в клетках человека. J Dent Res. 1991; 70 (2): 111–7. [ PubMed ] [ Google ученый ] 26. Мартини С., Д'Аддарио С., Колачевич А., Фокарди С., Боргини Ф., Сантуччи А. и др. Антимикробная активность в отношении штаммов Helicobacter pylori и антиоксидантные свойства листьев ежевики (Rubus ulmifolius) и выделенных соединений. Int J Противомикробные Агенты. 2009; 34 (1): 50–9. [ PubMed ] [ Google ученый ] 27. Cushnie TP, Lamb AJ. Антимикробная активность флавоноидов. Int J Противомикробные Агенты. 2005; 26 (5): 343–56. [ PubMed ] [ Google ученый ] 28. Amoros M, Simoes CM, Girre L, Sauvager F, Cormier M. Синергетическое действие флавонов и флавонолов против вируса простого герпеса типа 1 в клеточной культуре. Сравнение с противовирусной активностью прополиса. J Nat Prod. 1992; 55 (12): 1732–40. [ PubMed ] [ Google ученый ] 29. Дебаджи М., Татео Ф., Пагани Л., Луини М., Ромеро Е. Влияние прополисов флавоноидов на инфекционность и репликацию вируса. Microbiologica. 1990; 13 (3): 207–13. [ PubMed ] [ Google ученый ] 30. Шахат А.А., Кос П., Де Брюин Т., Аперс С., Хаммуда Ф.М., Исмаил С.И. и др. Противовирусная и антиоксидантная активность флавоноидов и проантоцианидинов из Crataegus sinaica. Планта Мед. 2002; 68 (6): 539–41. [ PubMed ] [ Google ученый ] 31. Schnitzler P, Neuner A, Nolkemper S, Zundel C, Nowack H, Sensch KH, et al. Противовирусная активность и способ действия экстрактов прополиса и отдельных соединений. Phytother Res. 24 (Приложение 1): S20–8. [ PubMed ] [ Google ученый ] 32. Лю С.Ю., Рим Ю.Ю., Парк В.Б. Противогерпетическая активность флавоноидов против вируса простого герпеса типа 1 (ВПГ-1) и типа 2 (ВПГ-2) in vitro. Arch Pharm Res. 2005; 28 (11): 1293–301. [ PubMed ] [ Google ученый ]